免疫膠體金技術(shù)的基本知識

接下來膠體金廠家來為大家介紹一下免疫膠體金技術(shù)的基本知識：

一、免疫膠體金技術(shù)基本知識

1、膠體金這個概念

氯金酸(HAuCl4)在氧化劑影響下，可匯聚成一定大小的小金顆粒，產(chǎn)生帶負(fù)電荷的疏水膠水溶液。因為靜電引力成為相對穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故名膠體金。

2、免疫金標(biāo)記技術(shù)

膠體金顆粒物表面負(fù)電與蛋白質(zhì)的正電官能團因靜電力而產(chǎn)生堅固融合。膠體金對蛋白質(zhì)有極強的吸附功能，蛋白質(zhì)等高分子材料被吸附到膠體金顆粒物表面，無化學(xué)鍵產(chǎn)生，標(biāo)識后大分子蛋白質(zhì)活力不發(fā)生變化。

3、膠體金的示蹤劑原理

金顆粒具有較高的電荷密度的特點。金標(biāo)蛋白質(zhì)在相應(yīng)的配位處大量聚集時，在顯微鏡下由此可見深褐色顆粒或可觀測紅色或淡粉色色斑。

免疫黃金白銀上色：運用金顆粒可催化反應(yīng)納米銀轉(zhuǎn)變成金屬銀這一原理，根據(jù)銀顆粒堆積，在電鏡下由此可見抗原抗體反應(yīng)的呈陽性位置展現(xiàn)銀的深褐色。

二、膠體金制取需要注意的事項

（1）玻璃器皿清潔：玻璃器皿應(yīng)肯定清理，用前酸洗鈍化、鋁硅酸鹽。

（2）實驗試劑、水體：試驗自來水一般用雙蒸水。緩沖溶液有足夠的緩沖容量，濃度值不可太高以防金膠體溶液自凝。

三、免疫膠體金的制取

1、制取膠體金標(biāo)識蛋白質(zhì)應(yīng)注意的問題

（1）蛋白質(zhì)的預(yù)備處理。蛋白質(zhì)先要對低電離度水分析，清除酸鹽成份。用微孔濾膜或超速離心去掉蛋白質(zhì)溶液中的細(xì)微顆粒。

（2）低含鹽量的緩沖溶液。過多鹽可讓金顆粒產(chǎn)生凝結(jié)。

（3）PH接近蛋白質(zhì)等電點或略偏堿性。蛋白質(zhì)所在融解情況比較適合偶聯(lián)反應(yīng)，蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)在金顆粒表面的吸附容量較大。

（4）蛋白質(zhì)最可用量挑選：可以使膠體金相對穩(wěn)定的適宜蛋白量加上10％即是最好標(biāo)識蛋白量。

（5）膠體金與蛋白質(zhì)偶聯(lián)反應(yīng)后，添加增稠劑，以避免發(fā)生凝結(jié)。一般選用PEG和牛血清白蛋白作增稠劑。

以上就是膠體金廠家為大家介紹的文章，希望能夠幫助到大家！